연구실이 많다는 것은 다들 아는데, PCR 연구실에 대해 아는 사람은 얼마나 될까요? PCR 실험실을 설계하기 위한 기본 요구 사항은 무엇입니까? 그럼 모두와 함께 토론할 VOLAB Xiaobian이 있을 거예요~
1, PCR 실험실 레이아웃
PCR 증폭 시험실은 원칙적으로 시약 보관 및 준비 영역, 시료 준비 영역, 증폭 반응 혼합물 준비 및 증폭 영역, 증폭산물 분석 영역 등 4개의 별도 작업 영역으로 구분됩니다. 교차-오염을 방지하기 위해 각 작업 영역에 들어갈 때는 반드시 단일 방향, 즉 시약 보관 및 준비 영역 → 검체 준비 영역 → 증폭 반응 혼합물 준비 및 증폭 영역 → 증폭산물 분석 영역에서만 엄격하게 단일 방향을 따라야 합니다. 각 실험 영역 간 시약 및 시료 이동은 전송 창을 통해 수행되어야 합니다.
2. 실험실 공조 환기 시스템 설계 및 압력 제어
PCR 실험실에는 엄격한 정제 요구사항이 없지만, 다양한 실험 영역 간의 교차 오염 가능성을 피하기 위해 -전류 공기 분배 시스템을 사용하는 것이 좋습니다.- 동시에 각 실험 영역의 압력 요구 사항을 보장하기 위해 송출 및 배기 비율을 엄격하게 제어해야 합니다.
2.1, 표본 준비 영역
이 분야의 주요 작업은 샘플 보존, 핵산(RNA, DNA) 추출, 보관, 증폭 반응 튜브에 추가 및 DNA 합성 결정입니다. 이 영역의 압력 구배 요구 사항은 다음과 같습니다. 인접 영역에서 이 영역으로의 에어로졸 오염을 방지하기 위해 인접 영역에 대한 양압입니다. 또한, 적재 작업 중 에어로졸-로 인한 오염 가능성이 있으므로 해당 지역에서 불필요한 보행을 피해야 합니다.
2.2. 시약 보관 및 준비 구역
이 실험 영역의 주요 작업은 저장 시약 준비, 시약 분배 및 주요 반응 혼합물 준비입니다. 검체 준비에 사용되는 시약 및 재료는 이 지역으로 직접 배송되어야 하며 다른 지역을 통과해서는 안 됩니다. 시약 원료는 이 구역에 저장되어야 하며 해당 구역에서 필요한 저장 시약으로 준비되어야 합니다. 공기압 제어에 대한 엄격한 요구 사항은 없습니다.
2.3, 증폭 제품 분석 영역
이 영역의 주요 작업은 증폭된 단편을 결정하는 것입니다. 이 영역은 증폭된 산물의 주요 오염원입니다. 따라서 이 영역에 대한 압력 구배 요구 사항은 다음과 같습니다. 증폭된 생성물이 해당 영역에서 다른 영역으로 확산되는 것을 방지하기 위한 인접 영역에 대한 음압.
2.4, 증폭 반응 혼합물 준비 및 증폭 구역
이 분야의 주요 작업은 DNA 증폭입니다. 또한, 준비된 DNA 템플릿(시료 준비 영역에서)과 주요 반응 혼합물(시약 보관 및 준비 영역에서)을 추가하여 반응 혼합물을 준비하는 등의 작업도 이 영역에서 수행할 수 있습니다. 이 영역의 압력 구배 요구 사항은 해당 영역에서 에어로졸 누출을 방지하기 위해 인접한 영역에 대한 음압입니다. 에어로졸로 인한 오염을 방지하기 위해서는 해당 지역에서 불필요한 보행을 최소화해야 합니다. 샘플링 등 개별 작업은 클린벤치에서 수행해야 합니다.
3.1. 엄격한 작업 영역 분할
(1) 각 실험 구역의 설정이 합리적입니다.
(2) 각 실험 영역에는 장비 품목과 시약 간의 혼동을 피하기 위해 명확한 표시(예: 눈에 띄는 집 번호 또는 다른 바탕색 등)가 있어야 합니다.
3.2, 합리적인 시스템 설정
(1) 합리적인 에어컨-환기 시스템 설정, 전체-센드 에어컨-시스템을 사용해 보세요.
(2) 엄격한 기류 압력 제어는 다양한 실험 영역에서 다양한 압력 요구 사항을 보장합니다.
3.3, 표준 작동
(1) 증폭 검사 실험실의 기술자는 -직업 교육을 수행해야 하며- 교육을 통과한 후에만 임상 유전자 증폭 테스트에 참여할 수 있습니다.
(2) 실험 작업 중에 작업자는 장갑을 착용하고 자주 교체해야 합니다. 또한 작업 중 일회용 캡을 사용하는 것도 오염을 방지하는 효과적인 조치입니다.
(3) 청소 작업은 적시에 정확합니다. 실험이 끝나면 해당 부위를 즉시 청소해야 합니다. 표면 소독이나 자외선 램프 조사 및 소독을 위한 기존 소독액 외에도 일부 실험 장비도 고압 멸균을 거쳐야 합니다.
3.4, 엄격한 관리
(1) 연구실 출입을 엄격히 통제한다. 실험과 관련되지 않은 사람은 임의로 실험실에 출입할 수 없으며, 필요한 경우 전체 실험 구역을 오가는 독립된 통로와 문을 설치해야 합니다.
(2) 교차-오염 가능성을 줄이기 위해 실험 구역 내 불필요한 보행을 최소화합니다.
(3) 증폭산물 분석 구역은 증폭산물 오염의 가장 중요한 원인이다. 폐액을 실험실에 버릴 수 없습니다. 반드시 소독액에 담근 후 실험실과 떨어진 곳에 폐기해야 합니다. 사용한 팁은 일회용입니다. 또한, 물품은 소독, 멸균한 후 소각 등 균일하게 처리하여야 한다.
(4) 증폭산물 분석분야에서는 특정 유전자 변이 및 독성물질이 사용될 수 있으므로 실험자의 안전보호에 특별한 주의를 기울여야 한다.
3.5. 완벽한 실험실 시설
완벽한 실험실 지원 시설은 실험 작업을 보장하는 데 필요한 조건입니다. 각 실험실의 다양한 실험 내용에 따라 초-클린 벤치, 원심분리기, 시료 공급 장치 등 해당 장비와 기구를 갖추어야 합니다.